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液相色譜柱壓升高原因
色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長(cháng)柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產(chǎn)生了雜質(zhì),造成流體阻力加大所致。淺析其原因,大致有以下幾方面:
1、流動(dòng)相的前處理
雜質(zhì)堵塞色譜柱進(jìn)口濾片,導致壓力升高。這往往是由于流動(dòng)相沒(méi)有過(guò)濾,或雖已過(guò)濾但過(guò)濾不徹底,使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所造成的。
2、樣品的沉淀
當溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),樣品進(jìn)入色譜柱,有時(shí)可能因溶解度降低而沉淀出來(lái),造成壓力升高。
3、晶體的析出
使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí),緩沖液中的無(wú)機鹽可能會(huì )殘留在體系之中,它們會(huì )因在新流動(dòng)相中的溶解度降低而析出,造成流體阻力加大、壓力升高。
4、**或霉菌孳生
霉菌在流動(dòng)相中、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖、生長(cháng)堵塞濾板,導致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時(shí)一般要現配現用。
5、溶質(zhì)吸附
當溶質(zhì)在柱子上有較強的吸附,且所用的流動(dòng)相難以將它們洗脫時(shí),累積的未洗脫溶質(zhì)也會(huì )造成阻力增大和壓力升高。
6、流動(dòng)相更換過(guò)度較快
當改變流動(dòng)相體系時(shí),不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動(dòng)相存在于同一個(gè)體系之中,也會(huì )造成壓力升高。
7、壓力脈沖
運行過(guò)程中,有時(shí)會(huì )產(chǎn)生系統內壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會(huì )造成多孔填料的崩壞和柱床結構的微小變化,填料微屑的長(cháng)期積累也可能會(huì )使柱床阻力增大,造成壓力升高。