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生物物理所科研儀器集成**獲得新突破
在“面向國家戰略需求、面向世界科學(xué)前沿,加強原始科學(xué)**、加強關(guān)鍵技術(shù)**與集成”的辦院方針指引下,生物物理所利用有限的科研資源將蛋白質(zhì)結構與功能的研究對象定位于難度較大的“人源膜蛋白和復合體”。研究過(guò)程中,從目標蛋白的選取到蛋白結構的完全解析需要經(jīng)過(guò)基因克隆、可溶性表達篩選、蛋白質(zhì)表達和純化、蛋白質(zhì)結晶、衍射數據獲取和結構解析等一系列繁雜步驟,能否高效、低耗地完成蛋白質(zhì)表達純化和結晶一直是嚴重制約蛋白質(zhì)結構研究的技術(shù)瓶頸。目前,國際上許多結構基因組學(xué)研究中心已經(jīng)認識到僅僅依靠手工操作很難突破這兩個(gè)瓶頸,于是開(kāi)始著(zhù)手建立具有一定自動(dòng)化程度的結構基因組學(xué)工作站;但目前國際上還沒(méi)有相對成熟的針對人源蛋白的自動(dòng)化流水線(xiàn)。如何成功構建這一自動(dòng)化流水線(xiàn)是一個(gè)極富挑戰性的任務(wù)。
生物物理所在《中國科學(xué)院技術(shù)支撐系統建設實(shí)施方案》的指導下,充分利用現有平臺設備,認真搜集和分析了當前國際上*先進(jìn)和*成功的克隆、蛋白質(zhì)表達、純化和結晶的新技術(shù),結合我國蛋白質(zhì)研究的具體需求,采用自動(dòng)化和多途徑并行的設計理念,在大規模高純度人源蛋白質(zhì)樣品制備和結晶的技術(shù)集成方面取得了實(shí)質(zhì)突破,完成了具有******的自動(dòng)化、高通量基因到晶體生產(chǎn)流水線(xiàn)。
自動(dòng)化、高通量基因到晶體生產(chǎn)流水線(xiàn)整合了“自動(dòng)化基因克隆和質(zhì)粒制備裝置”和“自動(dòng)化蛋白質(zhì)表達和檢測系統”,集成了F3Track Robot6關(guān)節機械手臂、FXp自動(dòng)化液體處理工作站、Varioskan光譜掃描多功能讀數儀、Cytomat細胞培養箱、Plate Washer洗板機、Plate Sealer 封板機、PCR儀等一批先進(jìn)設備。這一自動(dòng)化生產(chǎn)線(xiàn)建成以來(lái),順利完成了一系列實(shí)驗,取得了滿(mǎn)意的結果。
技術(shù)驗收專(zhuān)家組經(jīng)過(guò)嚴格審議和現場(chǎng)操作檢測,一致認為:該系統基于現有商用儀器設備,成功地進(jìn)行了技術(shù)集成**和功能拓展,達到了******。該系統能自動(dòng)化完成高通量PCR克隆、PCR產(chǎn)物純化、相關(guān)質(zhì)粒構建、純化和轉化以及蛋白質(zhì)表達、初步純化和檢測等實(shí)驗,并具備蛋白結晶池液制備和其它溶液處理等功能,顯著(zhù)提高了基因克隆和蛋白質(zhì)表達的效率和成功率,為規?;鞍踪|(zhì)結構和功能研究奠定了良好基礎。